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判断培养基稳定性与保存方法 - 尊龙凯时人生就博

发布时间:2025-03-26   信息来源:司马欢弘

在常规的生物实验中,研究人员时常会碰到一个情况:配制了200mL的培养基但实际使用了50mL。那么,剩余的培养基是否可以在下次继续使用?应该如何保存以保证其有效性?可以从以下两个方面进行判断:

判断培养基稳定性与保存方法 - 尊龙凯时人生就博

1. 污染风险评估

首先需要考虑使用和保存过程中的污染风险。如果存在显著的污染可能性,则不建议继续使用该培养基。(注:培养基不可重复灭菌)

2. 培养基成分的稳定性

通过培养基成分的稳定性来判断其存储的可行性。值得注意的是,培养基的存储条件和时间应通过相应的效期试验来确定,以下方法仅供进行初步判断。

一、稳定成分

(1) 稳定的无机盐:如磷酸盐、氯化钠和氯化钾等,这些物质不易受到光照和温度的影响,通常不参与氧化还原反应,因此,在长期存放过程中不会发生变化。

(2) 琼脂:在中性常温条件下相对稳定,作为凝固剂的琼脂在合适的保存条件下不会出现显著变化。然而,酸性条件和结冰会影响琼脂的结构,若长期存放过程中未密封,则可能导致琼脂失水变干。

二、相对稳定成分

(1) 蛋白胨、酵母提取物和牛肉提取物等营养成分,这些成分提供微生物生长所需的各种碳、氮源和维生素,能耐短时间的高温灭菌,相对较为稳定。然而,维生素在高温和日光条件下会逐渐分解,因此在短期内(不超过一个月)的室温保存通常是安全的,为了长期保存,推荐置于阴凉处或冷藏并避光。

(2) 糖醇苷类:主要用于提供碳源,类型繁多,其中一些相对稳定,但在高温灭菌后可能会出现焦化现象,导致pH下降。在培养基的含糖量不超过5g/L的情况下,短期内变化不大,如果同时含有磷酸盐,更有助于培养基的长期存放。

三、不稳定成分

(1) 抗生素:有些抗生素对高温不耐受,通常只能通过过滤去除杂菌,并且对光和热十分敏感。但某些抗生素如氯霉素和萘啶酮酸等则相对稳定。在含抗生素的培养基中,通常需要在2-8℃保存。

(2) 天然成分:如卵黄、血液和血清等,通常需现配现用,短期储存建议在2-8℃,不推荐长期保存。

(3) 氧化还原性成分:如亚铁离子、半胱氨酸和巯基乙醇酸钠等,易被氧化,需密闭保存。

(4) 染料及酸碱指示剂:带颜色的染料对光较敏感,需注意避光以防褪色。

(5) 不稳定的盐类:如亚硫酸氢钠和碳酸氢钠等,易分解或被氧化,因此含此类成分的培养基应现配现用或冷藏保存。

总结

若培养基中含有较为稳定的成分,可以在室温短期存储或冷藏长期保存;若含有不稳定成分,应现配现用,或在2-8℃条件下短期保存。

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注:本文为尊龙凯时人生就博原创内容,未经授权不得转载。