中文

English

尊龙凯时人生就博转染试剂选择指南

发布时间:2025-03-17   信息来源:耿鹏初

细胞转染是一种将外源遗传物质导入目标细胞的技术,广泛应用于生命科学研究、药物研发及新药开发等领域。化学转染法因其可通过调控化学物质浓度和作用时间等因素来精确控制转染效率与时间,成为最常用的转染方法之一。如何选择适合的转染试剂,是确保细胞转染实验成功和高效的关键。在市面上众多转染试剂中,如何挑选出最合适的产品?以下是一些重要的考虑因素。

尊龙凯时人生就博转染试剂选择指南

1. 根据实验目的

选择转染试剂时,需根据实验需求决定是进行稳定转染还是瞬时转染。虽然两者的步骤相似,但对外源基因的要求不同:稳定转染通常使用具有复制能力的质粒或病毒载体,而瞬时转染则不需此要求。稳定转染一般采用脂质体类试剂,细胞通过内吞作用完成转染;而瞬时转染更倾向使用纳米聚合物类试剂。

2. 根据细胞种类

不同细胞类型对转染效率的影响显著。例如,HEK293T细胞易于转染,常用于功能性蛋白和抗体的生产开发。然而,许多癌细胞,如肝癌细胞(HepG2)、乳腺癌细胞系列等,其转染效率较低,因此在肿瘤细胞或药物研究中常面临挑战。此外,贴壁细胞和悬浮细胞在转染过程中对转染试剂的需求也有所不同。通常,贴壁细胞使用脂质体介导的转染,而悬浮细胞则需要聚合物介导的转染。

3. 根据基因种类

转染通常涉及DNA与RNA两种:DNA转染主要用于将外源DNA导入真核细胞,进行基因表达和蛋白质合成;RNA转染则主要用于引入干扰RNA以研究特定基因功能。不同类型的转染试剂在转染效果和细胞毒性方面表现不一,如一些RNA转染试剂在DNA转染中效果较差,而反之亦然。此外,随着DNA载体大小的增加,转染难度也随之加大,一般当载体大小超过10,000 bp时,现有转染试剂难以实现有效转染。

4. 根据转染效果

一个理想的转染试剂应具备高效转染和低细胞毒性。高效转染能确保更多外源基因成功导入细胞,而低细胞毒性则能提高细胞存活率,确保实验结果的可靠性。从市面上常见转染试剂的表现来看,脂质体通常存在固有的细胞毒性,细胞死亡率一般在15%至30%之间,用于转染细胞死亡率低于15%的试剂,通常更具竞争力。

5. 根据操作简便性

选择操作简单且省时的转染试剂,可以显著节省实验的时间成本。操作简便性包含转染前后是否需更换培养基、转染试剂成分数量、孵育方式与时间,以及核酸溶液是否需要稀释等。操作简便的转染试剂对于多组对照条件的实验设计具有明显优势,可以节省实验材料和时间成本,同时简化实验步骤,提高实验的顺畅度。

在这里,我们推荐尊龙凯时人生就博的高效转染试剂系列,具体产品包括:

佰唯基转染试剂系列

1BGPNAM11/BGPNAM11Plus:该系列主要成分为纳米阳离子聚合物,能够有效与带负电荷的核酸分子结合形成复合物,以促进其进入细胞,适用于siRNA和质粒DNA转染,针对HEK293/293T等细胞的转染效率可达95%以上,细胞毒性低,转染48小时后细胞存活率可达85%。

2LNP30iMate:这是一款脂质体介导的转染试剂,适用于多种常规贴壁细胞,mRNA转染效率超过90%,且转染24小时后细胞存活率高达90%。

3LNP60iMate:专为HEK293等工程细胞系的质粒DNA、RNAi转染而设计,对癌细胞及原代细胞也具备较好转染效果,致力于为科研人员的基因工程实验提供强力支持。

实验干货

转染实验需考虑的几个影响因素包括:抗生素对细胞活性的影响、血清浓度对转染效率的影响、细胞生长状态与细胞密度的控制,以及核酸质量对转染效果的重大影响。确保这些条件的优化至关重要,以获取最佳的转染效果。

选择合适的转染试剂,确保细胞转染顺利成功,给您的实验带来实质性的成果,选择尊龙凯时人生就博助力您的基因工程研究项目!