本试剂盒仅供科学研究使用,严禁用于医学诊断。马硫酸雌酮(E1S)ELISA试剂盒使用说明书概述了其检测原理和操作流程。
检测原理
该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。具体流程为:在预先包被adropin(AD)抗体的微孔板中,依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体,之后进行温育并彻底洗涤。通过底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,最终在酸性环境中变为黄色。显色的深浅与样本中的adropin(AD)浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),据此计算样本浓度。
样本收集、处理及保存方法
1. 血清:使用无热原及内毒素的试管,尽量避免细胞刺激,血液采集后3000转离心10分钟,迅速分离血清和红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水捣碎,然后3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后未能及时检测,建议按一次用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融,解冻时需在室温下确保样品完全均匀解冻。
操作注意事项与试剂盒组成
注意:标准品(S0-S5)浓度依次为0、25、50、100、200、400 pg/mL。
试剂的准备和洗板方法
20×洗涤缓冲液的稀释:将蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel中以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘制标准品线性回归曲线,并按曲线方程计算各样本浓度值。
对以上操作的准确性和试剂盒的性能,尊龙凯时人生就博提示用户需谨慎对待,确保科研结果的可靠性及有效性。