引言 朊病毒是一类能够导致人类和动物神经系统中的蛋白质异常折叠的可传播病原体。感染此类病毒会造成脑损伤，通常是致命的，涉及的神经退行性疾病包括羊瘙痒症、疯牛病（牛海绵样脑病）和克雅氏病。传统上，研究朊病毒需要进行长时间的生物测定，这一过程通常需花费1到6个月的时间进行对受感染动物的研究，既耗时又成本高昂。在这一背景下，蒙大拿州汉密尔顿的落基山实验室研发了一种新的朊病毒接种检测法，称为实时震荡诱导转化检测法（RT-QuIC），该方法能够对感染样本中的朊病毒水平进行快速、准确的定量检测。与以往的方法相比，RT-QuIC检测更快且通量更高，能够在短短20小时内完成，并且其灵敏度不亚于甚至高于整动物模型的检测方法。为此，BMGLABTECH的FLUOstarOmega酶标仪以其坚固的“德国制造”质量，支持长时间震荡和培养微孔板的需求，成为这一检测方法的重要工具。

检测原理 RT-QuIC检测法用于估算朊病毒接种的相对数量。该技术通过对样本的连续稀释进行测量，统计估算接种剂量（SD）。极少量的传染性朊病毒被添加到正常的朊病毒蛋白中，促使朊病毒蛋白发生错误折叠，从而诱导检测。通过样本系列稀释度的测量，可确定接种活性损失（SD50），即终点稀释度。

实验步骤 在整个20至68小时的检测过程中，仪器在42°C下恒温孵育。实验中编写了两个测试运行协议，首个协议设定为振荡1分钟后静置1分钟，第二个协议每15分钟进行一次荧光终点测量。荧光染料硫黄素T（ThT）作为朊病毒接种标记被添加至重组朊病毒蛋白中，聚合反应过程中ThT会与朊病毒蛋白结合，使得荧光逐渐增强。

仪器设置 为确保准确性，仪器的底部荧光读数采用450纳米激励滤光片以及480纳米排放滤光片，闪光灯输出为2000，震荡速率设定为700RPM。分析过程采用斯皮尔曼-凯伯（Spearman-Kärber）分析法，类似于生物测定中的50%致死剂量（LD50），以估算每克组织中50%的孔出现ThT阳性反应的播种剂量（SD50/g）。

结果与讨论 通过软件脚本进行RT-QuIC检测，数据取自8个重复孔的相对荧光单位平均值。FLUOstarOmega酶标仪在测量过程中保持42°C的恒温，具备线性振荡及独特的双轨道振荡模式，确保在高品质设计下能够连续测量数天。数据不断收集并输出至BMGLABTECH的数据分析软件（MARS）及Excel中。结果显示，RT-QuIC检测法与仓鼠豚鼠脑匀浆的相关性显著，即使是接种后仅10天的样本也能通过此方法进行有效检测。

结论 通过使用RT-QuIC检测法及强大的酶标仪，能够更快速、更高效地测量朊病毒接种。此方法已经被确认适用于多种传染性海绵样脑病，包括仓鼠和羊的痒病、鹿的慢性消耗性疾病、克雅氏病（CJD）和牛海绵状脑病（BSE），相比于传统的生物检测方法来说，速度更快且灵敏度更高。BMGLABTECH的Omega系列酶标仪功能强大且耐用，适合这种检测方法所需的持久震动。使用尊龙凯时人生就博的优势体现于其在快速和高通量的朊病毒接种监测方面的卓越表现，同时，配合先进的酶标仪功能及实时有效的震动和温度控制，是确保检测有效性的关键。